Nova estratégia genética pode ajudar no combate ao greening em citros

Pesquisadores da Universidade Agrícola do Sul da China silenciaram um gene essencial no inseto Diaphorina citri, conhecido como psilídeo-dos-citros, e registraram efeitos letais e esterilizantes. O gene em questão, Syntaxin-1A (Syx1A), regula processos vitais no inseto. Ao bloquear sua expressão por meio de RNA interferente (RNAi), cientistas provocaram mortalidade superior a 70% em adultos, perda de peso, atrofia ovariana e falência reprodutiva.

O psilídeo é vetor do Candidatus Liberibacter asiaticus, bactéria causadora do Huanglongbing (HLB), doença sem cura conhecida e que devasta pomares de citros. A técnica testada com RNAi abre caminho para um controle mais específico e sustentável da praga, apontando para uma futura alternativa aos inseticidas tradicionais.

O gene Syx1A pertence à família Qa-SNARE, cuja função inclui a fusão de vesículas e a liberação de neurotransmissores. Em D. citri, sua expressão alcança pico nas glândulas salivares, mas também aparece em outros tecidos e em todas as fases do ciclo de vida.

Clonagem e caracterização

Os cientistas clonaram e caracterizaram o gene a partir do transcriptoma do inseto. A sequência codifica uma proteína com 309 aminoácidos e cerca de 35,7 kDa. As análises bioinformáticas mostraram domínios típicos da família SNARE, como SynN e a região transmembranar. A similaridade com outras espécies de insetos ultrapassa 78%.

As análises de expressão com RT-qPCR mostraram que Syx1A se expressa com intensidade nas fases de ovo, ninfas do quarto e quinto instares e em adultos jovens. Nos tecidos, glândulas salivares concentram os maiores níveis de RNA mensageiro, seguidas por intestino e testículos em adultos. Essa predominância indica que o gene participa ativamente da secreção salivar e da interação do inseto com as plantas hospedeiras.

Funções fisiológicas

Para investigar as funções fisiológicas do gene, os cientistas produziram RNA de fita dupla (dsRNA) e aplicaram via microinjeção em ninfas de quinto ínstar e adultos recém-emergidos. Após 48 horas, observaram queda de 39% na expressão de Syx1A em ninfas e de 58% em adultos. A taxa de mortalidade entre ninfas chegou a 58% no quinto dia. Nos adultos, 73% morreram até o sétimo dia. Em ambos os grupos, o peso corporal caiu significativamente.

A supressão do gene também comprometeu a reprodução. Fêmeas tratadas com dsRNA mostraram queda expressiva na postura de ovos a partir do terceiro dia. Entre os dias 3 e 11, a fecundidade caiu de forma progressiva, e a contagem acumulada de ovos por fêmea foi drasticamente menor que no grupo controle.

Análises morfológicas dos ovários revelaram degeneração evidente. Ovariolas das fêmeas controle continham oócitos maduros com pigmentação amarela intensa. Já nas fêmeas tratadas, os ovários eram menores, com falhas na deposição de vitelo e oócitos em estágios iniciais de desenvolvimento.

As alterações reprodutivas correlacionam-se com a regulação de genes envolvidos na vitelogênese. A equipe mediu a expressão de Vg1, VgA e VgR — genes codificadores da vitelogenina e de seu receptor. Após o silenciamento de Syx1A, os três apresentaram queda acentuada de transcrição, indicando que o gene interfere diretamente na produção e captação do vitelo pelos ovócitos.

O mecanismo observado sugere que Syx1A atua como regulador upstream na cascata reprodutiva, ao controlar indiretamente os genes vitelogênicos. Em outros insetos, como Locusta migratoria e Drosophila melanogaster, o mesmo gene apresenta funções semelhantes em processos neurológicos e reprodutivos.

Interferência por RNA

A interferência por RNA, mecanismo que degrada RNAs mensageiros de forma específica, já demonstrou eficácia contra pragas de diversas ordens, como Diptera e Coleoptera. O uso agrícola da tecnologia avança em duas frentes: em plantas transgênicas com genes de dsRNA e em formulações tópicas como sprays. Neste estudo, a aplicação foi feita por microinjeção — técnica adequada para ensaios laboratoriais.

As barreiras conhecidas à eficácia do RNAi incluem a instabilidade do dsRNA no intestino dos insetos e sua baixa absorção sistêmica. Para superar isso, os pesquisadores estudam o uso de nanocarregadores como lipossomos catiônicos, quitosana e nanopartículas poliméricas, capazes de proteger e facilitar a penetração do dsRNA.

No caso do psilídeo-dos-citros, múltiplas estratégias com RNAi já foram testadas com sucesso. Genes como cathepsina D, hexoquinase, V-ATPase-E e chitin synthase mostraram-se vulneráveis à tecnologia. O gene Syx1A, no entanto, destaca-se por provocar efeitos letais combinados à falência reprodutiva, uma combinação rara e eficaz para programas de controle populacional.

Fonte: Revista Cultivar, publicado em 28/08/2025

Fonte da imagem: Freepik